一.基因编辑鼠的分类:
1.转基因鼠（Transgenic,TG Mice）：指通过外源基因导入技术，将人工合成或来自其他物种的基因片段整合到小鼠基因组中，使其在特定组织或全身表达，从而用于研究基因功能、疾病机制或开发治疗策略的实验动物模型
2.敲除鼠（knock out,KO Mice）：利用 CRISPR/Cas9、ES 细胞等遗传工程技术，通过让特定基因 “沉默”，研究该基因功能，在疾病模型研究中，能明确基因缺失对疾病发生发展的影响，找疾病相关关键基因。
3.敲入鼠（knock-in, KI mice）：经基因工程把特定基因序列（外源或改造后的内源基因 ）精准插入鼠基因组特定位点。可用于研究特定基因过表达、特定突变影响，比如将人类疾病相关基因突变敲入小鼠，模拟人类疾病基因突变情况，探究突变在疾病发生中的作用机制。
4.条件性敲除鼠（CKO Mice）：依靠特殊系统（如 Cre - LoxP 系统 ），在特定组织、发育阶段敲除基因。Cre 酶在特定细胞类型、发育阶段表达，识别并切除含 loxP 位点基因，实现基因时空特异性敲除，能更精准研究基因在成体、特定组织中的功能，避免全身基因敲除的胚胎致死、代偿效应等问题，提升基因功能研究准确性 。
条件性基因敲除（CKO）小鼠
—— 基于Cre - loxP 系统
在基因功能研究里，条件性基因敲除（CKO）小鼠能够精准剖析基因在特定组织、特定阶段功能的关键模型，其核心依赖 Cre - loxP 系统，关键在于 Cre 酶和 flox 序列：
一、Cre 酶：基因重组的 “分子剪刀”
Cre 酶是能识别特定 DNA 序列（loxP 位点 ），并对两个 loxP 位点间 DNA 进行切割、重组的酶，相当于给基因编辑安了 “可控开关”。
组织特异性 Cre 酶：靠特定启动子驱动表达，让 Cre 酶只在特定细胞、组织里 表达。比如研究肝脏基因功能，就找肝脏特异性启动子驱动 Cre（如Alb启动子），这样 Cre 酶只在肝脏细胞活跃，精准针对肝脏基因操作，避免全身基因敲除干扰，帮我们明确基因在特定组织的作用。
诱导型 Cre 酶系统（时间维度精准调控 ）
①他莫昔芬（Tamoxifen）诱导的 Cre - ERT 系统：把 Cre 酶和改造的雌激素受体（ER）融合，成 Cre - ERT 融合蛋白。不存在他莫昔芬时，蛋白进不去细胞核，碰不到 DNA，基因编辑 “歇着”；加了他莫昔芬，融合蛋白激活，进细胞核，就能催化特定 DNA 位点重组，实现基因敲除。相当于给基因编辑设了 “药物开关”，想啥时候敲除，给药就行，能研究基因在不同发育阶段、疾病进程里的功能。
②多西环素（Doxycycline）诱导的 Cre 系统：用四环素控制的启动子调控 Cre 酶表达。有多西环素（四环素类抗生素 ）时，启动子启动，Cre 酶表达、活化，开展基因敲除；没药就不表达。这种 “诱导 - 表达” 模式，能灵活控制基因敲除时间，研究基因动态功能。
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条件性基因敲除（CKO）小鼠的构建与原理
在基因功能研究中，为探究特定基因在特定细胞、组织里的作用，全身性基因敲除可能引发的致命问题或发育异常，条件性基因敲除（CKO）小鼠是常用且关键的模型，其核心是 flox/flox 与 Cre/+ 小鼠的组合策略 ：
一、两种关键小鼠基因型
flox/flox 小鼠：这类小鼠中的目的基因基因，两端被 loxP 位点 “夹住”（可理解为给目标基因做了 “标记” ），相当于基因处于 “待敲除” 的预备状态，但光有这个标记，没后续 “剪刀”（Cre 酶 ），基因不会自己敲除。
Cre/+ 小鼠：小鼠基因组里带有 Cre 重组酶基因。但是Cre 酶的表达受特定调控，只在某个特定组织，或者特定发育阶段才会表达。比如用肝脏特异性启动子Alb驱动 Cre 表达，那 Cre 酶就只在肝脏细胞里 “干活”；要是用诱导型系统（像之前说的他莫昔芬诱导 ），还能控制 Cre 在特定时间点激活，实现基因敲除的时空特异性。
二、交配策略与后代基因型
1. 基础交配（F0→F1→F2 代 ）
F0 代：“F0 代阳性小鼠（Founder）” 是最初经基因编辑（如插入 loxP 位点等）的 “种子鼠”，和 “野生型小鼠（WT）” 交配，生下 F1 代 。这一步是把编辑过的基因引入繁殖谱系，让后代携带基础编辑元件（比如初步整合含 loxP 的基因结构 ）。
F1 代：得到flox杂合小鼠，flox杂合小鼠与flox杂合小鼠进行交配，可得到flox杂合小鼠，flox纯合小鼠以及WT小鼠
继续兄妹 / 与野生型回交，产生 F2 代，后代基因型开始分化，出现纯合 flox 小鼠（flox/flox）（目标基因两端被 loxP “夹住”，是待敲除的 “靶基因载体” ）、杂合 flox 小鼠（flox/+）（仅一个等位基因带 loxP ）、野生型小鼠（无编辑基因 ）。此时，Cre 酶（切割工具）和 flox 序列（待切割靶标）分别在不同小鼠里，还没 “配合” 起来。
2. 关键组合（F2→F3→F4 代 ）
核心逻辑：让 flox 小鼠（纯合 / 杂合） 和 Cre 小鼠 交配，利用 Cre 酶识别并切割 flox 小鼠里被 loxP 夹住的基因，实现 “特定组织 / 阶段的基因敲除”（因为 Cre 酶的表达受 “组织特异性启动子” 控制，只在特定细胞 / 时期干活 ）。
比如用 “肝脏特异性启动子驱动 Cre”，Cre 酶就只在肝脏细胞表达，只切割肝脏细胞里的 flox 基因，其他组织基因不变，精准研究 “基因在肝脏里的功能”。返回搜狐，查看更多